Molekylærbiologer rutinemæssigt placere fragmenter af DNA - plasmider - indeholder gener af interesse i bakterier. Dette er en enkel måde at replikere og producere mere af genet og /eller generere genets produkt, som kan være noget lignende insulin . Elektroporation
Elektroporation er en metode til at få plasmidet ind bakterier. Bakterier og DNA blandes i et rør og udsat for et elektrisk felt fremstillet ved en elektroporation maskine . Det elektriske felt slag små huller i bakterierne , så DNA'et i cellerne . Bakterier , der optager DNA mest effektivt er elektrokompetente celler.
Metode
elektrokompetente bakterier såsom E. coli kan produceres gennem en række gentagne centrifugeringer , første fjerne deres vækstmedium og erstatte det med ultrarent vand , og endelig at erstatte vandet med glycerol . I de sidste trin bakterierne resuspenderes i en lille mængde glycerol, opdelt i rør, frosset i flydende nitrogen og opbevaret lang sigt i en -80 grader Celsius ( -112 grader Fahrenheit) fryser.
Salg Overvejelser
Denne protokol er normalt udføres med store mængder , der kræver store kolber , agitatorer og centrifuger . Det er afgørende , at de skridt fra høst til opbevaring alle udføres på iskolde temperaturer. Ultra -rent vand skal benyttes.