Lyset produceret af ildfluer er blevet et vigtigt værktøj for molekylærbiologer . Firefly bio- luminescens - produceret af luciferase omdannelse af luciferin til oxyluciferin - blev første gang identificeret , karakteriseret og udviklede sig til luciferase reporter analysen af forskere ved University of California, San Diego i 1986 . Definitioner
Deoxyribonukleinsyre (DNA) fungerer som det genetiske materiale i cellerne. En promotorsekvens af DNA styrer ekspressionen af et gen - en DNA-sekvens , der producerer et specifikt protein . Som et særskilt stykke DNA , indeholder et plasmid et gen , såsom luciferase .
Metoder
En videnskabsmand konstruerer et plasmid , som indeholder en promotor og luciferasegenet . Dette plasmid transficeres - introduceres biologisk , kemisk eller mekanisk - i et dyr celle og senere samme celle er brudt åben for at fritage nogen producerede luciferase . Luciferin tilsættes til denne celle mix, og mængden af bio- luminescens produceres af luciferase omdannelse af luciferin til oxyluciferin måles . Kits og detaljerede protokoller er kommercielt tilgængelige for denne analyse.
Bruger
Mængden af bio- luminescens produceres i dette assay er proportional med styrken af promotor , og tjener derfor som en nyttig metode til at sammenligne forskellige promotorer. Det bliver vigtigt i industrielle miljøer , som optimerede promotorer kan øge mængden af protein produceret i samme mængde tid .