Bakterier er nyttige redskaber i gensplejsning. Gennem brug af plasmider , kan cirkulære dele af udskiftelige bakterielt DNA , organismer , såsom andre bakterier, blive forvandlet genetisk . Denne vejledning beskriver de grundlæggende metoder , der er involveret i at bruge bakterier til gensplejsning af en anden organisme . Ting du har brug
Ikke-dødelige bakteriearter (helst en harmløs variant af Escherichia coli)
anden ikke -dødelige bakterier arter
petriskål
Bakterier inkubator
restriktionsenzymer til målgen < br > 2 Sterile sløjfer
vandbad
Reagensglas
Vis Flere Instruktioner
Forberedelse af genet af interesse
1

Anskaf en prøve af de første bakterier arter ved pensling vedlagte koloni med en steril loop .
2

Wave den podede loop i et reagensglas gennem et vandbad ved ca 48 grader Celsius i fem sekunder .
< br > 3

Tilføj nogle ml restriktionsenzym til reagensglasset og opvarmet , podet sløjfe. Denne begrænsning enzym varierer afhængigt genet af interesse , der vil blive overført til de andre bakteriearter .
Omdannelse andre bakterier Arter
4

Dyp en anden steril loop ind en koloni af den anden bakteriearter , den ene, der skal transformeres.
5.

Spred bakterierne jævnt over en petriskål indeholdende agarose medium ved at skubbe den podede loop over agarose .
< br > 6

Lad bakterier inkuberes i to dage i en inkubator , således at bakteriekolonier dannes.
7

Tilsæt blandingen oprettede tidligere indeholdende genet af interesse for petriskål indeholdende bakteriekolonier .
8

Lad de bakterier, inkuberes i to dage i inkubatoren. Dette gør det muligt for arterne at optagelsen af generne føjet til fadet , og sæt dem ind i deres genomer.
9

udtænke en metode til at teste de transformerede bakterier at se om de assimileret generne. For eksempel , hvis genet indsættes tilskud bakterien antibiotikaresistens kan det være praktisk at tilføje diske af ampicillin til agarplade . Hvis de overlever , de tog op genet.