CFSE eller carboxyfluorescein - succinimidyl - ester, er et fluorescerende cellefarvning løsning, der bruges i lymfocytmigration studier. Lymfocytter er de blodets hvide celler, der har evnen til at bevæge sig ud af blodet til at indfange fremmede mikroorganismer , spiller en vigtig rolle i immun - forsvar . CFSE kan også anvendes til at mærke thymocyter og embryonale celler , ifølge " Immunology and Cell Biology . " Humane Lymphocite farvningsprotokol

Teknikere forberede en cellesuspension med 20 millioner celler pr ml i 0,1 procent føtalt okseserum ( FBS) og phosphatbufret saltvand ( PBS ) . De tilføjer CFSE og lad suspension sidde i otte minutter , ifølge The University of Kansas Medical Center. Forvarmet FBS tilsættes derefter og cellerne inkuberes i et vandbad ved 98.6 grader Fahrenheit i 10 minutter . Celler centrifugeres derefter i fem minutter, supernatanten kasseres og cellerne vaskes i en opløsning af 2 procent FBS /PBS tre gange . Cellerne er fastgjort med paraformaldehyd .
Fotos Forenklet CFSE farvningsprotokol

Teknikere centrifuge blodprøver , fjerne de røde blodlegemer . Senere , de vaske lymfocytterne med PBS for at fjerne fri protein. At være i stand til at observere celledeling efter to dage, CFSE tilsættes i lave koncentrationer i otte minutter , hvorefter reaktionen er blokeret med føtalt kalveserum . Celler vaskes to gange med PBS /FCS . Denne protokol kan bruges i " in vivo " eller " in vitro"- forsøg , ifølge The Hedrick Lab ved University of California .
Protokol for Aktivering af Naive CD8 T-celler i vitro

naiv T-celle er en lymfocyt , der har differentieret i knoglemarven. Denne celletype anses moden , og cellerne reagerer på nye patogener at immunsystemet aldrig har mødt . Teknikere inkuber Influenzavirus og celleprøver på is i 30 minutter , centrifugeres og fortsætte udrugningen i 18 timer ved 98.6 grader Fahrenheit . Senere celler farves med CFSE og resultaterne analyseres under flowcytometri.