High performance væskekromatografi ( HPLC) er en fælles metode til lab analyse, hvor en Prøven adskilles i sine kemiske bestanddele , som er passerer gennem en kolonne. Kolonnen fyldes med en porøs pakning typisk baseret på behandlet silicagel . En standard modfasesøjle , såsom en C8 , kan undertiden blive tilstoppet eller forurenet . Sådanne kolonner kan ofte regenereres bruge et par enkle teknikker. Ting du skal
HPLC instrument
Water
Methanol
Acetonitril
Isopropanol
Methylenchlorid
Hexan
Vis Flere Instruktioner
Revitalisere en kolonne
1

Tag tilsmudsede kolonnen, og ændre sin position, således at den mobile fase går nu ind i, hvad der normalt afgangen fra kolonnen. Vedhæft en exit linje til den anden ende af søjlen ( den ende, der oprindeligt var indløbet ) , og køre dette ind i en affaldsbeholder.
2

Pump gennem en serie af opløsningsmidler i faldende polaritet . En grundlæggende anbefalede serie er at starte med methanol , derefter videre gennem acetonitril , acetonitril /isopropanol ( 75:25 ) , isopropanol, methylenchlorid og hexan . Hvis den mobile fase oprindeligt sidder i kolonnen var en puffer , bør en vask med vand forud for methanol . En strømningshastighed på 1 til 2 ml per minut er typisk egnet , og cirka 10 søjlevolumener af hvert opløsningsmiddel bør pumpes igennem . Kolonnen volumen er det indre rum ikke taget op af pakning og er beregnet som (0,7 x pi x (ID /2) ^ 2 x L ) , hvor ID er kolonnens indvendige diameter og L er dens længde.
< Br >
3

Pumpe yderligere 10 søjlevolumener isopropanol gennem søjlen for at forberede den til brug med den originale mobile fase . Hvis den oprindelige mobil fase blev pufret , også pumpe vand gennem søjlen efter isopropanol før returnering til det oprindelige bufret mobil fase .
4

Afbryd søjlen og vende og tilslut det, så det er i sin normal konfiguration ( dvs. med den mobile fase pumpes ind i kolonneindgang ) . Tilslut udløb kolonnen til detektoren.